Diabetologia：启动时但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次显现出新口内自身HIV到显现出新1DF肾病临床疼痛的重大突破亲率在学童里期就有不太好的详细描述，多个口内自身HIV阳性的学童里有70%在血清转换后10将近患上肾病，而随访15年的学童这一分之一增高到84%。相比之下之下，占临床1DF肾病一半以上的DF1DF肾病的复发机制还未给予必要的研究者。

越发多的人开始用到分段的系统来下定义1DF肾病的重大突破：个体在显现出新多种口内自身HIV时转到第1收尾，显现出新浓度异常时转到第2收尾，显现出新疼痛时转到第3收尾。一些多发口内自身HIV阳性的个体，在1期和2期，重大突破极快，并拓展为复发的1DF肾病。我们之前详细描述了一三组在首次样品到多种口内自身HIV采样后至少10年无肾病的极慢速重大突破者，这三组病症人口数少，但特性非常明确。随后，我们发现口内自身肝细胞酪氨酸CD8+T线或粒体反可不会在重大突破快速速的病症里基本不普遍存在，但在现收尾复发和曾一度普遍存在的肾病病症里很更容易样品到。这不太可能表明，与重大突破病症相比之下，这些病症致病反可不会的平衡进一步提高。

20世纪研究者表明，尽管平衡性T线或粒体(Treg)使用量正常人，但肾病病症普遍存在一些机制毛病，其里包括对IL-2的反可不会意志力降低。此外，肾病病症里的效可不CD4+T线或粒体不太可能对平衡不够具抵抗性，展现出新为效可不T线或粒体的可抑制移向，自然转化成的Treg和人体内转化成的作用于Treg，以及肝细胞经历的CD4+T线或粒体里IL-2反可不会移向。本研究者的目的是详细描述了CD4+平衡性T线或粒体(Treg)在领头极快速速重大突破者里的特性，他们的为数为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

步骤：BOX研究者是一项以人群为基础的纵向研究者，在21岁以下确诊的病症子女里肥胖检查1DF肾病的危险因素。我们之前详细描述了曾一度快速速重大突破者的特性，他们维持多重口内自身HIV阳性超过10年，但未显现出新肾病的临床疼痛，慢速性或非开展性致病。随后，10名继续维持无肾病并乐意发放大量尿液采样的快速速重大突破者纳入T和B线或粒体机制系统性。在目前的研究者里，8名慢速重大突破者(SP三组)，里位平均年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁错综复杂的口内自身HIV阳性。所有的大多数人都始终维持1DF肾病重大突破的1期，尽管一些人随后无法控制了口内自身HIV对某些肝细胞的橘红色会，然而，一名病症已经始终维持2期至少6年，但未显现出新临床疼痛，一名病症被诊疗为肾病，该检验者72岁，在挖掘检验采样时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据系统性里对该丝氨酸开展了直接系统性报告。分离外周血单个核线或粒体(PBMCs)，有别于多参数流式线或粒体法术和T线或粒体可抑制试验系统性报告丝氨酸里Treg的频亲率、表DF和机制。用到FlowSOM和CITRUS(聚类鉴别、表征和回归)开展无统筹聚类系统性，系统性报告Treg表DF。

结果：与肥胖丝氨酸相比之下，来自慢速重大突破体的知觉CD4+T线或粒体的统筹聚类揭示，启动时的知觉CD4+ Treg频亲率增高，与糖皮质激素作用于的TNFR具体细胞(GITR)传达增高有关。一名HbA1c升高的病症与重大突破快速速者和匹配的对照三组相比之下，Treg谱有所相异。机制系统性表明，与肥胖丝氨酸相比之下，来自快速速重大突破体的Treg介导的CD4+效可不T线或粒体可抑制值得注意受损。展现出新为对效可不CD4+T线或粒体CD25和CD134传达的可抑制增高。

三幅1 系统地的表DF系统性揭示，CD4+Treg亚DF在慢速重大突破配置文件里增高。由FlowSOM转化成的Treg四楼，涌进在来自所有丝氨酸的活CD4+CD45RA -线或粒体上。根据标上物传达鉴别出新10个元簇:知觉T线或粒体_1;知觉T cell_2;知觉T cell_3;知觉T cell_4;CD49b知觉T线或粒体;HLA-DR + GITR +知觉T线或粒体;寄存器Treg_1;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;和寄存器Treg_4。(a)用到9个相异Treg标上转化成的10个元簇的MST。每个数据流象征性一个空降兵(100个空降兵)，极大的元空降兵(10个元空降兵)在数据流三组周围上色。每个数据流里的面包三幅坚称单个标上的传达级别。(b)每个元聚类的热三幅，以揭示全面性标上传达。(c, d)为HD三组(c)和SP三组(d)转化成三幅，以及FlowSOM识别的每个元簇的大块。(e-l)相尤其同位素为每个metacluster罐线或三幅(同位素> 0.05%)考虑到为HD和SP三组:寄存器Treg_2 (e),寄存器Treg_3 (f),寄存器Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +知觉T线或粒体(h)、知觉T cell_1(i),知觉T cell_2 (j),知觉T cell_3 (k) n d CD49b知觉T线或粒体(l)。粉红色圆圈象征性**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon选取符号秩验证。此键适用于三幅形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

三幅2 用到CITRUS的系统性表明证实，Treg频亲率的增高是重大突破快速速的标上。分级去极化(a - f)和水果系统性(g-k)尤其SP大多数人和匹配的HD大多数人在CD4+CD45RA−T线或粒体上的差异。(a)酪氨酸CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群体的象征性性三幅。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR传达开展分离，模拟FlowSOM群体。(b) HD(黑点)和SP(虎纹)三组以及丝氨酸SP 606(粉红色)里CD25+ cd127的频亲率摘要三幅。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+去极化闭包的罐线或三幅;(c) HLA-DRloGITR−(寄存器Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(寄存器Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(寄存器Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+寄存器T cell)。(g - i)柑桔簇锥形由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3传达风力著色，箭头值得注意新的簇被识别为SP和HD配置文件错综复杂的相异。(j)罐线或三幅揭示了在SP(虎纹)和HD(灰点)三组里，CITRUS知觉Treg_3和Treg_4的相尤其同位素(分之一)。(k)直方三幅揭示每个簇的表DF(粉红色)和Treg标上相尤其传达与背景传达(黄色);上列，寄存器Treg_3;下面即刻，寄存器Treg_4。背景与所有其他簇里标上的传达有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon选取符号秩验证

三幅3 与肥胖献血者相比之下，重大突破快速速者知觉treg的GITR增高。每个知觉CD4+T线或粒体元簇(知觉T线或粒体_1;知觉T cell_2;知觉T cell_3;CD49b +知觉T线或粒体;HLA-DR + GITR +知觉T线或粒体;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)样品每个传达标上的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)配置文件的传达热三幅(sp606不包括在内)。(c,d)知觉Treg_4元簇里所有HD(粉红色)、所有SP(黄色)和SP 606(粉红色)的FlowSOM GITR传达串联，揭示直方三幅(c)和摘要三幅(d)。Wilcoxon选取符号秩和验证，p< 0.07(粉红色)所有丝氨酸包括，p< 0.05(黄色)丝氨酸SP 606和匹配的HD不包括在测试里。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs里GITR传达，从分级去极化，从所有HD(粉红色)、所有SP(黄色)和SP 606(粉红色)串联，揭示直方三幅(e)和摘要三幅(f) *p< 0.05, Wilcoxon选取符号秩验证

三幅4 来自快速速重大突破的CD4+ treg线或粒体控制效可不CD4+T线或粒体的意志力降低。SP三组用黄色的线或和圆圈坚称，HD三组用黑色的线或和圆圈坚称，粉红色的线或/圆圈坚称丝氨酸sp606。用到CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T线或粒体开展分选。CD4+CD25−(此番者)被标上为CFSE, Treg按掩蔽的分之一校准。用抗CD3 /28微珠增殖线或粒体，养成3天内开展流式线或粒体法术样品。(a-d)与CD4+此番者相尤其可不的treg养成(暂时性)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD此番者养成。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE可抑制总和(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的可抑制总和。用到阳性对照(启动时的作出新反可不线或粒体另有treg)量度可抑制总和。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重尤其测试

三幅5 效可不CD4+T线或粒体对快速速重大突破的T线或粒体增殖的可抑制不够脆弱。SP三组用黄色的线或和圆圈坚称，HD三组用黑色的线或和圆圈坚称，粉红色的线或/圆圈坚称丝氨酸sp606。用到CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T线或粒体开展分选。CD4+CD25−(此番者)被cfsel标上，treg按掩蔽的分之一校准。用抗CD3 /28微珠增殖线或粒体，养成3天内开展流式线或粒体法术(CD25反染)和线或粒体因子系统性。HD Treg与HD、SP或sp606此番者共同养成。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE可抑制次之(b)。(c,d) CD25可抑制次之(c)和CD134可抑制次之(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共养成里的传达。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重尤其测试

正确性：我们得出新的正确性是，来自快速速重大突破子的增殖知觉CD4+Treg在GITR传达里给予了扩展和丰富，强调了进一步研究者Treg在1DF肾病风险个体里的表征的必要性。

原文出新处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28